豬肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　BS-8208 豬肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒

　　以下是天津本生豬肝素結合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理：

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測樣本中的HB-EGF濃度。通過包被抗體捕獲目標蛋白，再結合酶標抗體形成復合物，經TMB顯色后測定OD值，濃度與吸光度呈正相關。

　　二、試劑盒組成

　　主要成分?

　　預包被微孔板

　　標準品(通常含凍干粉，需用稀釋液重構)

　　酶標抗體、顯色劑(A/B液)、終止液

　　濃縮洗滌液(需稀釋使用)

　　保存條件?

　　未開封試劑需2-8℃保存，標準品及樣本稀釋后建議分裝凍存(-20℃以下)，避免反復凍融。

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：離心去除雜質(1000×g，15-20分鐘)，溶血樣本不可用。

　　組織勻漿?：需用PBS沖洗后勻漿，離心取上清(5000×g，5-10分鐘)。

　　細胞培養(yǎng)上清?：直接離心(1000×g，20分鐘)后檢測。

　　四、操作步驟

　　標準品稀釋?：按說明書梯度稀釋(通常為2倍系列稀釋)。

　　加樣與溫育?：

　　每孔加入標準品或樣本100μL，37℃孵育1-2小時。

　　洗滌?：使用稀釋后的洗滌液洗板4-6次。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB顯色液，避光反應10-15分鐘，后加終止液。

　　檢測?：450nm波長讀取OD值，繪制標準曲線計算濃度。

　　五、注意事項

　　避免試劑交叉污染，不同批號組件勿混用。

　　顯色時間需嚴格控制，強陽性樣本可能需進一步稀釋。

　　實驗前需平衡所有試劑至室溫(約30分鐘)。

　　如需具體參數(shù)(如標準品初始濃度、靈敏度等)，請參考試劑盒配套說明書或咨詢技術老師。

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