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      大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒實驗使用說明
      發(fā)布時間:2025/4/7瀏覽:468次
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        以下是關(guān)于大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

        BS-3649 大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒

        一、實驗原理

        采用雙抗體夾心法檢測樣本中HMGB-1含量。通過包被抗體捕獲目標(biāo)蛋白后,依次加入檢測抗體和酶標(biāo)記物形成復(fù)合物,最終通過TMB顯色反應(yīng)測定濃度?。

        二、樣本處理要求

        血清?:室溫凝固10-20分鐘后2000-3000rpm離心20分鐘?

        血漿?:需使用EDTA/檸檬酸鈉抗凝,離心后取上清?

        組織勻漿?:按重量加入PBS勻漿后離心?

        保存條件?:建議分裝凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融?

        三、試劑盒組成

        包含包被板、標(biāo)準(zhǔn)品(濃度通常為0-160μg/L)、生物素標(biāo)記抗體、鏈霉親和素-HRP、顯色液(TMB)及終止液等?。不同規(guī)格試劑盒組分體積存在差異(如48孔/96孔配置)?。

        四、操作步驟

        標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說明書梯度稀釋?

        加樣順序?:依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→檢測抗體→酶結(jié)合物?

        溫育條件?:37℃反應(yīng),具體時間參照不同試劑盒要求(通常30-60分鐘)?

        顯色終止?:加入TMB顯色15分鐘后加終止液?

        五、注意事項

        濃縮洗滌液需1:20稀釋,使用前需溶解結(jié)晶?

        避免底物接觸金屬器械,顯色后需立即檢測OD值?

        計算結(jié)果時需注意樣本稀釋倍數(shù)(通常需×5)?

        六、結(jié)果計算

        在450nm波長下測定OD值,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度?。建議使用專業(yè)酶標(biāo)儀分析?。

        注:不同品牌試劑盒可能存在參數(shù)差異,請以實際說明書為準(zhǔn)?。


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